Badanie zawartości, składu i fluorescencji chlorofili – wykorzystanie w badaniach na organizmach fotosyntetyzujących
Głównym celem kursu jest nauka podstawowych technik eksperymentalnych wykorzystywanych w badaniach zawartości, składu i fluorescencji chlorofili.
Szczegółowe cele kursu:
- izolacja chloroplastów i ekstrakcja chlorofilu;
- pomiar zawartości chlorofilu metodami spektrofotometrycznymi;
- pomiar fluorescencji chlorofilu w temperaturze pokojowej i ciekłego azotu;
- obserwacja izolatu chloroplastów w mikroskopie jasnego pola i mikroskopie fluorescencyjnym;
- rozdział barwników fotosyntetycznych metodą chromatografii cienkowarstwowej (HP-TLC);
- podstawy pomiarów modulowanej fluorescencji chlorofilu a in vivo (PAM imaging);
- podstawy teoretyczne absorpcji i fluorescencji chlorofilu.
Specjalistyczny sprzęt/urządzenia/oprogramowanie wykorzystywane podczas kursu:
wirówka z chłodzeniem, spektrofotometr, fluorymetr, zestaw do wysokosprawnej chromatografii cienkowarstwowej, fluorymetr z funkcją obrazowania, mikroskop fluorescencyjny.
Skrócony opis programu zajęć:
- izolacja chloroplastów;
- ekstrakcja i pomiar zawartości chlorofilu;
- pomiar fluorescencji chlorofilu;
- obserwacje mikroskopowe chloroplastów;
- rozdział barwników fotosyntetycznych;
- pomiar modulowanej fluorescencji chlorofilu a in vivo.
Efekty kształcenia/korzyści dla słuchaczy:
Po ukończeniu zajęć uczestnik będzie:
- potrafił przeprowadzić izolację chloroplastów oraz ekstrakcję chlorofili z materiału biologicznego oraz określić jego zawartość w badanej próbie;
- potrafił przeprowadzić pomiar fluorescencji chlorofilu in vitro i in vivo;
- potrafił dokonać obserwacji chloroplastów w mikroskopie świetlnym;
- potrafił rozdzielić barwniki fotosyntetyczne z wykorzystaniem metody TLC.
Przeznaczenie kursu:
Kurs przeznaczony dla
pracowników jednostek naukowych, nauczycieli i edukatorów, doktorantów, studentów